Sintese da guia CRISPR
Preparação dos plasmídios: Preparar os plasmídios contendo a guia CRISPR e a proteína Cas9. Esses plasmídios são então transferes para as células que serão editadas.
Expressão da proteína Cas9: As células transferes com o plasmídio expressarão a proteína Cas9 e a guia CRISPR.
Síntese da guia CRISPR: A guia CRISPR é sintetizada na célula transferes e é usada para dirigir a proteína Cas9 ao local de edição no DNA.
Expressão da guia CRISPR: A guia CRISPR é expressa na célula e é usada para dirigir a proteína Cas9 ao local de edição no DNA.
Edição genética: A proteína Cas9 corta o DNA na região alvo indicada pela guia CRISPR. O sistema de reparo do DNA da célula reparará a lesão, permitindo a inserção ou deleção de material genético.
Verificação dos resultados: Verifique se a edição genética foi bem-sucedida usando técnicas como PCR, seqüenciamento de DNA ou análise de imunofluorescência.
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