Design CRISPR
Identificação da sequência alvo: Escolha a sequência de DNA que deseja editar, que pode ser uma região específica do gene ou uma sequência não codificante.
Seleção de ferramentas de design de guias CRISPR: Utilize uma ferramenta de design de guias CRISPR, como a CRISPR Design, CHOPCHOP, ou a CRISPRdirect, para ajudar a selecionar a sequência correta para a guia CRISPR.
Verificação de espécie: Certifique-se de que a ferramenta de design de guia CRISPR está configurada para a espécie adequada.
Verificação de off-target: Verifique se a guia CRISPR selecionada não tem matches off-target em outras regiões do genoma além da sequência alvo.
Otimização da guia CRISPR: Otimize a guia CRISPR para maximizar a eficiência de edição e minimizar o risco de efeitos colaterais.
Verificação final: Verifique se a guia CRISPR selecionada atende aos requisitos de qualidade, incluindo a presença de palindromos, a ausência de repetições, a presença de uma região PAM (Protospacer Adjacent Motif) adequada e a ausência de matches off-target.
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